IN VITRO PROPAGATION OF MIYAMASUKASHI-YURI (LILIUM MACULATUM Thunb. var. bukosanense), AN ENDANGERED PLANT SPECIES

Resumen

Lilium maculatum var. bukosanense (Honda) Hara, llamada en japonés Miyamasukashi-yuri, es una especie silvestre que está amenazada en Japón. Antes de que desaparezca, el establecimiento de estrategias de propagación in vitro podrían coadyuvar a proveer información para su rescate, su conservación ex-situ y futura explotación comercial, así como su posible uso en el mejoramiento genético. Para la inducción de bulbillos se usaron cinco escamas de bulbos (catáfilos) asépticos por cada tratamiento, las cuales fueron sembradas en el medio de cultivo de MS a la mitad de su concentración, suplementado con sacarosa 3 %, agar 0.8 %, a un pH de 5.8, y se evaluaron dos reguladores del crecimiento vegetal (RCV): ácido αnaftalenacético (ANA) a 0.0, 1.0 y 2.0 mg L^-1 en combinación con tidiazurón (TDZ) a 0.0 y 0.5 mg L^-1. También se evaluaron dos condiciones de iluminación (luz y oscuridad) y la presencia/ausencia en el medio de cultivo de carbón activado (CA), para un total de 16 tratamientos. El cultivo de escamas en condiciones de luz y en presencia de CA mostraron un efecto favorable en la inducción de bulbillos. El número promedio de bulbillos inducidos en condiciones de luz fue el doble (4 por explante) de los inducidos en oscuridad, ambos en presencia de CA, e independientemente del tratamiento hormonal. Los tratamientos que dieron mejor respuesta fueron ANA 2 mg L^-1 + TDZ 0.5 mg L^-1 , y sin RCV, todos ellos con CA y luz. En general, después de 12 semanas de cultivo se obtuvo un promedio de 2.4 bulbillos por explante, y seis meses más tarde se regeneraron más de 640 plantas de un total de 320 explantes, con raíces y hojas; todas éstas fueron aclimatadas y transferidas a condiciones de invernadero. Todas las plantas regeneradas fueron morfológicamente similares entre ellas y mostraron los rasgos distintivos que caracterizan la flor de esta especie. Además, los análisis citológicos revelaron el mismo número de cromosomas (2n=24) en todas las plantas examinadas. El procedimiento descrito aquí no requirió de una fase de callo, por lo que el simple cultivo de escamas se pudo aplicar exitosamente como una estrategia para la propagación in vitro en 12 meses, y así lograr el rescate y conservación de esta especie.